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caov-4 (人卵巢癌細胞) 該細胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM), 配置培養(yǎng)基時需加入 10%FBS,1% Anti-Anti。
聯(lián)系電話:15221858802
品牌 | 信裕生物 | 純度 | 99.9 |
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貨號 | XY-H807 | 規(guī)格 | 1*10^6cells/T25方瓶 |
供貨周期 | 一周 | 主要用途 | 僅用于科研 |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁 |
caov-4 (人卵巢癌細胞)
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 人卵巢癌細胞(caov-4) |
細胞別稱 | caov-4 |
商品貨號 | XY-H807 |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 45歲/女 |
組織來源 | 輸卵管 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 表皮細胞 |
細胞綜述 | Doubling time: >120 hours (PubMed=25984343). Microsatellite instability: Stable(MSS) (Sanger). |
生物安全等級 | 1 |
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
培養(yǎng)體系 | 該細胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM), 配置培養(yǎng)基時需加入 10%FBS,1% Anti-Anti。 |
建議傳代比例 | 1:2,運輸瓶中充滿完培,傳代可以吸起來使用。 |
消化時間 | 3-4分鐘,注意消化終止 |
凍存條件 | 10%DMSO+90%完培+1%AntiAnti/雙抗 |
Doublingtime | 3-4天 |
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c、棄上清,沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
d、待細胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
三、培養(yǎng)注意事項
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